細胞無血清培養(yǎng)基被廣泛應用與哪些地方？如何使用？

更新時間：2022-01-12

　　細胞無血清培養(yǎng)基被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無血清培養(yǎng)基含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能，如提供細胞貼壁所需的基質，抗生物反應器剪切力，作為脂質和其他生長分化因子的載體等。

　　無血清培養(yǎng)基應用的優(yōu)點：

　　（1）成分的限定性；

　　（2）產(chǎn)品質量一致性；

　　（3）簡化生產(chǎn)過程；

　　（4）易于控制培養(yǎng)環(huán)境；

　　（5）細胞類型的優(yōu)化配方。

　　無血清培養(yǎng)基應用

　　1、DC細胞、CIK細胞和NK細胞的長期增殖培養(yǎng)

　　2、PBL細胞和TIL細胞的長期增殖培養(yǎng)

　　3、單核細胞和巨噬細胞的長期增殖培養(yǎng)

　　4、T淋巴細胞的長期增殖培養(yǎng)

　　細胞無血清培養(yǎng)基使用方法

　　1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。

　　2、單個核細胞的接種與誘導活化

　　1)0d時，繃胞計數(shù)。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養(yǎng)液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

　　2)1d時(24小時)，添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。

　　3、細胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴增

　　1)3d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1：2左右（原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積）

　　2)5d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1：3左右。

　　3)7d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(06-08）x106cell/mL。補液比例大致在1：2左右。

　　4)9d時，將剩余培養(yǎng)液全部加入。

　　4、收獲細胞

　　培養(yǎng)周期結束后，依據(jù)細胞量收獲細胞。

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